大旱是危及蕨类藤本植物荒岛生存的很严峻挑站中的一种。ABA与JA经由协作效应同向调整蕨类藤本植物抗涝性，但俩者在大旱积极地响应中的协作体制仍不指明。

近期，安徽高中喻景权院士评选技术团队，朱常安院士在Plant Biotechnology Journal期刊上发表题为“ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato”的文章。该研究发现了在番茄耐旱过程中，乙烯响应因子（ERF.D2）的Ser-52位点被钙依赖性蛋白激酶27（CPK27）以ABA依赖性方式磷酸化，随后经历PUB22介导的泛素化降解。ERF.D2的降解导致JA生物合成基因（烯丙稀氧化物环化酶（AOC）和12-氧代植物二烯酸还原酶3（OPR3））的转录水平和内源性JA浓度升高，从而增强番茄的抗旱性。这些发现为理解ABA与JA在番茄抗旱过程中的协同作用机制提供了新视角。拜谱生物技术为该研究成果提供了蛋白酶互作组、磷硝化作用修饰语组检测分析服务。

英文版副标题：ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato （Plant Biotechnology Journal IF：10.5）

中文字幕题目：ERF.D2通过协同调控脱落酸和茉莉酸负向调控番茄的抗旱性

客人行业：浙江大学

探索原材料：番茄蛋白冻干粉

拜谱带来工艺：核蛋白互作组、磷硝化作用绘制组

高技术路径：

理论研究最终

01、ERF.D2是CPK27的靶点，负调节番茄的耐旱性

建立ERF.D2敲除变异体（erf.d2）和过表答株系（OE-ERF.D2），干旱气候办理后，erf.d2变异株问题更轻，过表答株耐旱学习能力下降（图1a）且离体叶面表现形式更加高的水汽溜走率（图1b）。完成Y2H、co-IP、LCI等检测关系證明，ERF.D2与CPK27随时形成完美做用，且ABA办理不错加强互作构造（图1c-e）。其次完成身体之外溶解检测和MG132调控剂办理等检测关系證明ABA完成加强CPK27与ERF.D2的互作，加快ERF.D2经泛素化手段溶解（图1f-i）。

图1 ERF.D2是CPK27的靶点，负控制番茄的耐旱性

02、CPK27磷酸性反应ERF.D2以把控其血清质稳确定性

鉴于CPK27具有蛋白激酶功能，免疫沉淀和Phos-tag免疫印迹实验表明，CPK27可使ERF.D2蛋白磷酸化，ABA可进一步提高ERF.D2的磷酸化水平（图2a-c）。将MBP-ERF.D2与His-CPK27进行体外磷酸化反应后进行磷过酸掩盖组分析。Ser-47和Ser-52被鉴定为潜在的磷酸化位点。点突变验证发现ERF.D2中的Ser-52是由CPK27磷酸化的主要位点（图2d），并且ERF.D2S52A的降解率显著降低（图2e-f）。

图2 CPK27磷碱化ERF.D2以把控好其血清质比较稳确定

03、PUB22介导磷硝化作用ERF.D2的泛素化光降解

干旱胁迫下ERF.D2蛋白含量降低（图3a-b)，且外源性ABA处理显著降低了ERF.D2蛋白水平（图3c-d）。通过球蛋白互作组发现关键E3连接酶PUB22，PUB22突变体表现出更明显的抗旱敏感性，而且ERF.D2蛋白能通过ABA依赖性方式直接与PUB22相互作用。表达CPK27时，PUB22介导的ERF.D2泛素化作用显著增强，磷酸化模拟形式的ERF.D2S52D显示出更高的泛素化水平，而ERF.D2S52A时，PUB22介导的泛素化作用几乎完全被阻断（图3e-g）。抑制剂MG132处理，ERF.D2-GFP蛋白的积累量显著增加（图3i-j）。

图3 PUB22介导磷过酸的ERF.D2泛素化化学降解

04、ERF.D2限制AOC和OPR3的展示，负调节干旱气候引发的茉莉酸生物工程生成

对ERF.D2变动株和比对株开始7天少水处置，并开始转录组测序。在ERF.D2变动株中，有4713个表观遗传遗传被上浮，42二十六个表观遗传遗传被下跌（图4b）。但其中1159个表观遗传遗传只在ERF.D2变动株的旱情处置中上浮（图4c），那些表观遗传遗传聚集于刀口影响、茉莉酸获得、脂质分解甚至茉莉酸影响等生物技术学历程（图4d）。在与JA获得相关内容的表观遗传遗传中，AOC和OPR3的表明技术分明高过许多表观遗传遗传（图4e），并收获效验（图4f-g）。在事件调查实践中证件了ERF.D2与AOC和OPR3打火子相护用。

图4 ERF.D2可以抑制AOC和OPR3的表达出来，负监测旱情诱导型的茉莉酸生物技术制作而成

一篇文章个人总结

本实验阐述了ERF.D2在ABA与JA干早胁迫互作中的关键点联络线意义。ABA刺激的CPK27介导的ERF.D2磷酸性反应过程中 ，增加了其被PUB22泛素化的率，降底其仰制茉莉酸生物制品聚合的意义，然后提升自己番茄抗旱救灾能力素质（图5）。

图5 ABA-ERF，D2-JA管控作物抗涝应激性沙盘模型

拜谱个人心得体会

本研究首次揭示了ERF.D2作为ABA与JA信号交叉的关键节点，阐明“ABA诱导ERF.D2磷酸化-泛素化降解-JA合成增强”的协同机制。该研究成果中拜谱生态学为其提供蛋清互作组、磷碱化淡化组的检测与分析。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋白酶质组学、体现组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参照医学文献：Zhu C, Li X, Zhang M, et al. ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato. Plant Biotechnol J. Published online May27, 2025. doi:10.1111/pbi.70157